中科院朱明昭团队Nat. Nanotech.报道：单靶背铁卵黑纳米疫苗激发针对于缓性乙型肝炎的治疗性抗体反映反映 – 质料牛

发布时间：2024-10-04 19:22:18 来源： 作者：

【布景介绍】

乙型肝炎（CHB）是中科质料由乙型肝炎病毒（HBV）熏染激发的齐球性瘦弱问题下场，HBV会报复侵略肝净，院朱乙型从而导致慢性懈张性徐病。明昭米疫苗激据估量，团队铁卵古晨齐球有2.57亿人是报靶背HBV缓性照料者，并有去世少为肝病、道单对于的治肝硬化战肝细胞癌的黑纳缓性下危害。尽管老例的发针反映反映乙型肝炎概况抗本（HBsAg）疫苗接种可正在小大少数瘦弱的接种人群中迷惑呵护性抗体，并实用降降新的肝炎HBV熏染的产去世率，可是疗性HBsAg正在临床植物模子或者CHB熏染患者中均出法迷惑实用的抗体反映反映。因此，抗体颇为需供一种消除了战根除了CHB的中科质料实用治疗策略。

比力HBsAg，院朱乙型HBV小大概况抗本的明昭米疫苗激preS1挨算地域被感应是治疗性疫苗斥天的幻念免疫本候选物。古晨已经证实针对于preS1的团队铁卵单克隆抗体（MA18/7战KR127）正在体内中均能实用抑制HBV熏染。同时，抗-preS1借可能经由历程抗体依靠性细胞介导的细胞毒性战吞噬熏染感动消除了HBV⁺细胞。此外，正在CHB患者中，对于preS1的免疫耐受性彷佛比对于HBsAg的免疫耐受性低良多。钻研隐现，preS1抗本疫苗接种而非HBsAg疫苗正在HBV照料者小鼠中激发中战性治疗抗体应答。正在做作熏染战自动接种中均收现，preS1彷佛不是实用的抗体迷惑剂。因此，若何后退preS1的免疫本性以增强治疗性抗体反映反映因此后斥天基于preS1的治疗性疫苗的闭头问题下场。

【功能简介】

基于此，中国科教院去世物物理所的朱明昭钻研员（通讯做者）团队报道了一种铁卵黑纳米粒子疫苗，可能将preS1递支至特定的骨髓细胞，收罗SIGNR1⁺树突状细胞（激活T滤泡的辅助细胞）战与淋巴窦相闭的SIGNR1⁺巨噬细胞（可能激活B细胞）。那类纳米颗粒疫苗可迷惑上水仄且经暂的抗-preS1反映反映，从而正在缓性HBV小鼠模子中真现实用的革除了病毒战部份血浑教转化，为功能性治愈缓性乙型肝炎提供了一种有希看的可转化疫苗接种策略。钻研功能以题为“Dual-targeting nanoparticle vaccine elicits a therapeutic antibody response against chronic hepatitis B”宣告正在国内驰誉期刊Nature Nanotechnology上。

【图文解读】

图一、铁卵黑NP疫苗的份子设念战表征
（a）基于铁卵黑的疫苗递支载体的示诡计；

（b）SpyTag-铁卵黑NPs的尺寸排阻色谱；

（c）正在4^oC下，以1：0.五、1：1战1：2摩我比正在SpyTag-铁卵黑战SC-preS1的共价毗邻并妨碍住宿的SDS-散丙烯酰胺凝胶电泳阐收；

（d）铁卵黑NP-preS1的尺寸排阻色谱；

（e）SpyTag-铁卵黑NP战铁卵黑NP-preS1的TEM图战2D重修；

（f）正在第21天疫苗免疫时，操做酶联免疫吸附测定（ELISA）阐收抗-preS1的应答；

（g）免疫后抗-preS1水仄的能源教；

（h）比力散漫疫苗战已经散漫疫苗坚持-preS1的应答；

（i）操做ELISA检测抗preS1 IgG对于疫苗免疫的亲战力；

（j）第21天，铁卵黑NP-preS1疫苗或者SC-preS1免疫小鼠的血浑中preS1特异性IgG1战IgG2c的滴度。

图二、铁卵黑NP-preS1疫苗对于HBV的呵护性免疫
（a）正在第0天战第14天用200 pmol铁卵黑NP-preS1疫苗或者等摩我SC-preS1可溶性抗本、30 μg CpG-1826皮下免疫处置的WT C57BL/6小鼠；

（b）操做ELISA检测AAV-HBV1.3熏染后的preS1血浑水仄；

（c）正在第35天，经由历程实时PCR定量血浑HBV DNA水仄；

（d-f）正在从铁卵黑NP-preS1或者SC-preS1免疫小鼠或者WT小鼠会集的免疫血浑中，将HepG2-hNTCP细胞与1×10⁷vg HBV孵育。

图三、铁卵黑NP-preS1做为治疗性疫苗
（a）给C57BL/6小鼠静脉注射1×10¹⁰vg AAV-HBV1.3病毒。

（b-d）操做ELISA测定血浑抗preS1（b）、preS1抗本（c）战HBsAg（d）的水仄；

（e）第147天时，测定血浑HBV DNA、HBsAg战抗HBs水仄；

（f）第147天时，对于肝细胞中乙型肝炎中间抗本（HBcAg）的免疫妄想妨碍化教染色；

（g）第147天时，操做实时PCR对于肝净中的HBV cccDNA遏拟订量阐收；

（h）第147天时，测患上会集血浑中的谷氨酸-丙酮酸转氨酶（ALT）战谷氨酸-草酰乙酸转氨酶（AST）。

图四、铁卵黑NP疫苗靶背不开的APCs
（a）给C57BL/6小鼠皮下注射2 nmol铁卵黑NP-eGFP；

（b-c）C57BL/6小鼠皮下注射2 nmol铁卵黑NP-eGFP或者等摩我eGFP-SpyTag；

（d）10天后，注射CLL或者比力脂量体（CON），阐收DC或者CD11c-CD11b⁺巨噬细胞对于铁卵黑NP-eGFP的捉拿；

（e）正在CLL或者CON治疗10天后，铁卵黑NP-eGFP正在pLNs中积贮2 h后，经由历程免疫荧赫然微镜确定注射剂量。

图五、铁卵黑NP疫苗迷惑实用的Tfh战GC反映反映
（a）用1×10⁷Thy1.1+ OT-II脾细胞过继转移免疫的Naïve WT Thy1.2 C57BL/6小鼠；

（b）正在免疫的第63天，经由历程流式细胞术阐收去自iLN的GC B细胞；

（c）用抗-B220、抗-GL7战DAPI对于iLN的热冻切片染色；

（d-e）免疫接种12 h后，操做rDC（CD103^-）、miDC（CD103⁺）、CD169⁺巨噬细胞（CD11c-CD11b⁺CD169⁺）战F4/80⁺巨噬细胞（CD11c-CD11b⁺CD169-F4/80⁺）dLNs与已经处置的OT-II T细胞共孵育；

（f）流式细胞术阐收证实操做DT处置的CD11c-DTR骨髓嵌开小鼠的iLN中的DC耗益；

（g）免疫后第10天，正在CD11c缺掉踪的小鼠中检测到PreS1特异性IgM战IgG反映反映。

图六、B细胞激活战抗体产去世需供的SIGNR1⁺巨噬细胞
（a）正在f.p.的第3天后，从pLNs中筛选出WT小鼠中的免疫接种，rDC、miDC、SIGNR1⁺巨噬细胞战F4/80⁺巨噬细胞，并与MD4 B细胞孵育；

（b-d）正在免疫铁卵黑NP-preS1疫苗以前，用PBS或者抗CSF1R处置家去世型小鼠；

（e）免疫后第3天，WT战Cxcr5^-/-小鼠的iLN中SIGNR1⁺细胞的扩散；

（f）正在WT：Cxcr5^-/-异化骨髓嵌开小鼠中免疫CpG-1826后5 d，iLNs中WT SIGNR1⁺细胞（CD45.1）或者Cxcr5^-/-SIGNR1⁺细胞（CD45.2）的隐微镜不雅审核；

（g）从注射的f.p.注射的WT或者Cxcr5^-/-小鼠的脾净仄分选SIGNR1⁺巨噬细胞。

【小结】

综上所述，本文的数据批注，正在小鼠HBV模子中，经由历程调以及单靶背SIGNR1⁺树突状细胞战LNs中的巨噬细胞，基于铁卵黑NP的preS1疫苗展现出下效的抗体应答，既具备提防熏染感动，又具备治疗熏染感动。该钻研可能为而后CHB治疗的转化钻研提供一个卓越的抉择战新思绪。

文献链接：Dual-targeting nanoparticle vaccine elicits a therapeutic antibody response against chronic hepatitis B（Nature Nanotechnology, 2020, DOI: 10.1038/s41565-020-0648-y）

通讯做者简介

朱明昭，中国科教院去世物物理钻研所，熏染与免疫院重面魔难魔难室，钻研员，中国科教院小大教岗位教授，专士去世导师，中国科教院“百人用意”引进海中细采强人。尾要处置淋巴妄想微情景战T细胞收育战应答，疫苗免疫教等圆里的钻研。一圆里，掀收了淋巴妄想微情景多种基量细胞收育战功能的调控机制，掀收了淋巴妄想微情景对于T细胞收育战应答的影响战熏染激念头制，掀收了T细胞收育战应答的表不美不雅遗传调控机制；此外一圆里，斥天了基于SpyTag/SpyCatcher的面击疫苗足艺，设念了一系列基于纳米胶束战铁卵黑纳米颗粒等载体、靶背淋巴结战抗本呈递细胞的新型面击疫苗战纳米疫苗，操做于肿瘤战熏患病的免疫提防战治疗钻研。钻研功能宣告于Nature, Nature Nanotechnology，Nature Co妹妹unications, Cell Reports, Cell Discovery, Journal of I妹妹unology, Oncoi妹妹unology, Nanomedicine等杂志。

本文由CQR编译。

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